在美国试管婴儿，通常都会将受精卵培养到第5至7天，培养到第5～7天的主要原因是：
1、继续观察胚胎发育潜力，有潜力的第三天胚胎才会继续发育成5～7天的囊胚，同时，胚胎师将根据胚胎的形态学对囊胚进行评级。
2、胚胎植入前遗传学检测PGT（第三代试管婴儿），科学研究证明，50-70%的流产被证明是胚胎中的染色体不平衡 （染色体太少或太多）导致，PGT检测可以解决大龄生子染色体异常，阻断家庭遗传疾病，有效降低流产率和大幅度提高活产率；
需要注意的是，美国早在多年前已禁止在第三天胚胎上取样（影响胚胎发育），在第5～7天的囊胚滋养层（TE）取样送检更安全。
3、根据结果选择囊胚移植，争取最高活产率。
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一、囊胚评级
胚胎师根据囊胚的发育过程、内细胞团和滋养层细胞的形态（如表），对囊胚进行评分。
| 发育 | 1期：早期有腔室囊胚，囊胚腔小于胚胎总体积的1/2; 2期：囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2; 3期：完全扩张囊胚，囊胚腔完全占据了胚胎的总体积; 4期：扩张囊胚，囊胚腔完全充满胚胎，胚胎总体积变大，透明带变薄; 5期：正在孵出的囊胚，囊胚的一部分从透明带中逸出; 6期：孵出的囊胚，囊胚全部从透明带中逸出。 |
| 内细胞团分级—内层细胞，将会继续发育成“胎儿 | A级：细胞数目多，排列紧密; B级：细胞数目少，排列松散; C级：细胞数目很少。 |
| 滋养层细胞分级—外层细胞，将继续发育成“胎盘” | A级：上皮细胞层由较多的细胞组成，结构致密; B级：上皮细胞层由不多的细胞组成,结构松散; C级：上皮细胞层由稀疏的细胞组成。 |
发育阶段 1期～5期图示
(图片来源于 The magazine inviTRA)
我们通常在报告中看到5AA、3AA、6AB这样的囊胚分级报告：第1个数字代表囊胚的发育阶段；另外两个字母，第1个表示将来发育成胎儿的内细胞团质量，第2个字母表示将来发育成胎盘的滋养层细胞的质量，质量等级最高为A，其次是B、C。同时，囊胚形成的天数也是重要参考指标。
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二、PGT检测
PGT检测分为PGT-A，PGT-M和PGT-SR。正常情况下，大多数人只做PGT-A检测，有家族遗传疾病，或试管前夫妻的基因筛查异常时，才会对囊胚进行后两项检查。
| 1.非整倍体的植入前基因检测PGT-A | 植入前胚胎中最常见的染色体问题。当胚胎的染色体数量不正确（增加或丢失）时，会导致移植失败、流产或染色体疾病，例如唐氏综合症（21 号染色体的额外拷贝）。50-70%的流产被证明是胚胎中的染色体不平衡 （染色体太少或太多）导致。 |
对应原有名称PGS。 随着女性年龄的增长非整倍体胚胎概率越高。25岁时，75% 的女性卵子染色体正常，35 岁时，大约50%女性卵子染色体正常，40 岁时，大约 10-15% 的卵子染色体正常。 |
| 2.单基因/单基因缺陷的植入前基因检测PGT-M | GT-M 于 1990 年代初首次开发，用于筛查 X 连锁疾病（如脆性 X 染色体）的胚胎。该技术已得到改进，包括任何具有已知突变的遗传性遗传病，如囊性纤维化、泰-萨克斯病、肌肉萎缩症营养不良，以及最近的遗传性癌症。根据父母情况，它们有 25%或50% 的机会传递给胚胎。 |
检测胚胎染色体结构异常的部分。 对应原有名称PGD |
| 3.染色体结构重排的植入前基因检测PGT-SR | 适用于夫妻双方其中一方有染色体重排，例如易位或倒位，该测试寻找这些重排的任何不平衡形式，从而减少流产的机会和生育染色体异常孩子的机会。 |
通过当前最先进的NGS技术（PGT-A检测技术），可以检测到1号至22号的常染色体和性染色体（X染色体、Y染色体）各有几条。
NGS的分析结果如下图所示，通常常染色体均为2条，常染色体正常的情况显示在基线位置。染色体异常，3条（三体性 Trisomy）显示在蓝线位置；染色体1条的情况（单体性Monosomy）显示在红线位置；马赛克现象（Mosaicism），就是在1个囊胚上染色体正常的细胞和染色体异常的细胞混合在一起的现象，显示在两条线的中间。
第23对性染色体，两条X染色体，XX女孩显示在红线以下；X和Y各一条，XY男孩显示在红线位置。
图1. 染色体正常 男孩
图2. 染色体异常 性染色体异常
9号染色体三体性，18号染色体单体性，性染色体异常（X染色体2条，Y染色体1条，合计3条）
图3. 染色体异常 女孩
3号三体马赛克Mosaicism（位于基线和三体线中间）16单体性马赛克（位于基线和单体线中间）
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三、活产率
自试管婴儿技术以来，人们一直在研究什么样的胚胎更具发育潜力，什么样的胚胎更健康，并挑选更好的胚胎植入来提高活产率。而囊胚评级和PGT-A检测是美国目前常用的两种方法。有了PGT-A报告后，
1）未通过PGT-A的囊胚，一般诊所会直接丢弃，不管囊胚等级如何。
2）通过PGT-A的囊胚，会根据囊胚等级评估活产率，并选择性移植。如
活产率70%及以上：第五天的5AA、4AA，其次5BA、5AB、5BB，4BA 3AA 3BA
活产率65%及以上：第五天的4AB 4BB 3AB，其次3AB 3BB 6AA 6BA 6AB 6BB
还有活产率60%、55%、50%及以下的PGT-A囊胚……..
例如PGT-A报告1：5个囊胚，2个正常（Euploid，1男1女）。第5天4BB的女孩活产率是65%及以上，第6天4AA的男孩活产率是60%及以上，可以选择移植。
例如PGT-A报告2：5个囊胚，3个正常（Euploid，2男1女）。活产率高的依次是：4AA 3AA 4B+B。
被丢弃的4BA虽然囊胚等级属于第一梯队，但因为第16条三体异常，胚胎可能患有严重的先天缺陷、生长迟缓、难以存在过前三个月等现象，具体请参考美国国家医学图书馆资料 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9082733/），也没有人愿意拿肚子试。
总的来说，囊胚等级越高通过PGT-A检测的概率越高，但并不代表所有等级高的囊胚都能通过PGT-A检测；同时，PGT-A检测正常的囊胚，不管等级如何，都可以尝试移植。另外，还需要注意的是，有关马赛克（Mosaicism）囊胚的处理，目前业界还没有正式的定论。根据程度不同，健康宝贝出生的可能性也是存在的。
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